乳酸作為發(fā)酵反應(yīng)過(guò)程中的重要代謝產(chǎn)物,在發(fā)酵過(guò)程監(jiān)控中對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)具有十分重要的意義。在傳統(tǒng)的發(fā)酵反應(yīng)監(jiān)測(cè)中,一般采用生化分析儀器或離線液相系統(tǒng)進(jìn)行監(jiān)測(cè)。生化分析儀器由于專屬性不夠,可能影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。而離線液相系統(tǒng)需要人工進(jìn)行樣品提取及前處理,無(wú)法實(shí)現(xiàn)全時(shí)段反應(yīng)實(shí)時(shí)監(jiān)控。
本研究將 Agilent InfinityLab 在線液相色譜系統(tǒng)與發(fā)酵罐聯(lián)用,通過(guò)外部電機(jī)驅(qū)動(dòng),在設(shè)定時(shí)間從發(fā)酵罐中吸取樣品,過(guò)濾后與外置取樣閥連接,對(duì)發(fā)酵反應(yīng)中的乳酸進(jìn)行檢測(cè),使用預(yù)先設(shè)定的檢測(cè)方法進(jìn)行取樣和數(shù)據(jù)分析。在整個(gè)發(fā)酵反應(yīng)過(guò)程中,可實(shí)現(xiàn)對(duì)發(fā)酵罐中乳酸含量的全自動(dòng)監(jiān)測(cè)。
實(shí)驗(yàn)方案
色譜條件
結(jié)果與討論
專屬性實(shí)驗(yàn)圖譜
不同監(jiān)測(cè)方法下乳酸含量的結(jié)果對(duì)比
本研究使用 Agilent InfinityLab 在線液相色譜系統(tǒng),對(duì)某實(shí)際發(fā)酵過(guò)程中的乳酸含量進(jìn)行監(jiān)測(cè)。同時(shí)作為比較,使用手動(dòng)取樣和處理,分別通過(guò)生化檢測(cè)儀器和離線高效液相色譜系統(tǒng)進(jìn)行檢測(cè)。通過(guò)這三種檢測(cè)方法得到的乳酸含量隨時(shí)間變化的趨勢(shì)如下圖所示。
小 結(jié)
本實(shí)驗(yàn)將 Agilent InfinityLab 在線液相色譜系統(tǒng)與發(fā)酵罐聯(lián)用,對(duì)發(fā)酵過(guò)程中的乳酸含量進(jìn)行在線監(jiān)控。通過(guò)優(yōu)化色譜條件,提升乳酸檢測(cè)的專屬性,以保證結(jié)果準(zhǔn)確度。同時(shí),在線液相色譜系統(tǒng)省去了樣品提取及前處理的過(guò)程,有效減少人為失誤。而全自動(dòng)化的采集及檢測(cè)過(guò)程,相較傳統(tǒng)生化檢測(cè)及離線液相色譜系統(tǒng),大幅度提升監(jiān)測(cè)結(jié)果反饋速度。真正意義上實(shí)現(xiàn),全時(shí)段無(wú)人化樣品檢測(cè),對(duì)于發(fā)酵罐中乳酸含量的監(jiān)測(cè)具有重要價(jià)值。
在線液相色譜系統(tǒng)也有望應(yīng)用于監(jiān)測(cè)發(fā)酵過(guò)程中的其他成分,例如通過(guò)調(diào)整色譜條件,可以對(duì)發(fā)酵罐中的抗體物質(zhì)進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè);通過(guò)與質(zhì)譜聯(lián)用,可以對(duì)反應(yīng)過(guò)程中的未知雜質(zhì)進(jìn)行定性/定量分析。
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