動物源性食品中四環(huán)素類殘留檢測

方法一：依據(jù)GBT21317-2007

1. 前處理（以牛肉為例）
     取已經(jīng)勻漿好的牛肉5g（到0.01g），置于50ml離心管中，加入50ul，10ppm的混標(biāo)，保證每kg肉中含1mg標(biāo)樣。
    分別加入20ml、20ml、10ml 0.1mol/L EDTA-Mallvaine緩沖液冰水浴中超聲10min后取出，3000r/min下離心5min，合并上清液，定容至50ml，離心，取上清液，混勻，待凈化。
Mallvaine緩沖液配制：將500ml 0.1mol/L 檸檬酸溶液與312.5 ml 0.2mol/L 磷酸氫二納溶液混合，NaOH溶液調(diào)節(jié)pH值至4.0+/- 0.05
    0.1mol/L EDTA-Mallvaine緩沖液配制：稱取30.25g乙二胺四乙酸二鈉放入812.5 ml Mallvaine緩沖液中，使其溶解，混勻。 
固相萃取小柱：
InertSep Pharma （3ml/60mg或6ml/500mg）WondaSep HLB 3ml/60mg均可 
SPE方法：
活化/平衡：5ml甲醇、5ml水
上樣：50ml待測液中準(zhǔn)確取10ml過柱
清洗：5ml水、5ml甲醇：水=1：19
小柱脫水干燥
洗脫：10ml甲醇：乙酸乙酯=1：9
將洗脫液氮吹至干，用流動相定容至1ml，過濾，待測。
2. 色譜分析
色譜柱：InertSustain C18 5um 4.6*250mm
流動相：乙腈：甲醇：0.01%草酸溶液=2：1：7
流速：1.0ml/min
柱溫：25℃
進(jìn)樣量：60 ul
檢測波長：350nm
儀器：Shimadzu LC-20A
3. 實驗結(jié)果
基質(zhì)加標(biāo)濃度為 1mg/kg，3次平行實驗結(jié)果如下：